PRODUCTINFORMATON

	MYELOPEROXIDASE HUMAINE

Information générale sur le produit

Nom du produit	myeloeroxidase des leucocytaires polymorphonuclear
Déscription	Protéine haem qui catalyse des oxidations par H₂O₂, inclus MPO-chloride-mediate qui tue des microbes et des cellules de cancer, l’inactivitée de facteurs chemotactiques, reliation traversale de protéines et iodination de protéines.
Forme	vert solide, lyophilise de 5mM phosphate buffer, pH 7.4
Solubilité	Réconstitution de 100 µg avec 800 µl d’eau distillée donne presque 2.0 µM par haem calculé avec un coefficient d’extinction molaire de 430 nm de 91000 M^-1cm^-1.
Entreposage	Déposé en dessous de 0°C ce produit lyophilisé est stabile pendant des années. Entreposage de la forme reconstituée à 4°C pendant 2 semaines n’a pas d’effet sur l’activité d’enzyme. Si des dissolutions doivent etre déposées pendant des periodes plus longues, la concentration du protéine devrait etre tenue en dessus de 1 mg/ml, et l’activité devrait etre déterminée avant l’utilisation. Solutions gelées de myeloperoxidase pourraient produire une perte substantielle d’activité.
Source	Préparé du sang humain qui a été testé négatif par certificat pour HBsAg et anticorps SIDA. EXCLUSIVEMENT POUR LA RECHERCHE – N’EST PAS POUR L’UTILISATION HUMAINE OU COMME MÉDICAMENT!
Numéro CAS	9003-99-0
Numéro EC	1.11.1.7
Poids moléculaire	~ 145 000 Da (voir MALDI-TOF Spectre)
Pureté	> 99.5 %
Reinheitszahl	A₄₃₀ / A₂₈₀ ³ 0.84 (voir UV / VIS Spectre)
Activité spécifique	1350 22 1300 4.4 75	– – – – –	1750 27 1700 5.6 95	unitées par mg (assay 1, Guaiacol conforme a Sigma) unitées par mg (assay 2, Guaiacol) unitées par mg (assay 3, TMB) unitées par mg (assay 4, MCD) unitées par mg (assay 5, TNB)

Définition détaillée de l’unité

Assay 1
(Guaiacol - Sigma)

Assay 2
(Guaiacol)

Assay 3
(TMB)

Assay 4
(MCD)

Assay 5
(TNB)

Assay 1 (Guaiacol conforme a Sigma)

Une unitée produit une hausse en absorbance à 470 nm de 1.0 par minute à pH 7.0 et 25°C, calculé du taux initial de la réaction utilisant guaiacol comme substrat.
Réaction totale du volume		3.035 ml
Concentration de l’épreuve finale		49 mM phosphate buffer, pH 7.0 99 mM guaiacol 0.0017% (w/w) hydrogen peroxide 0.35 uniteé MPO
Références	Sigma Quality Control Test Procedure, Enzymatic Assay of Myeloperoxidase, http://www.sigmaaldrich.com

Assay 1
(Guaiacol - Sigma)

Assay 2
(Guaiacol)

Assay 3
(TMB)

Assay 4
(MCD)

Assay 5
(TNB)

Assay 2 (Guaiacol)

Une unitée produit une hausse en absorbance à 470 nm de 1.0 par minute à pH 7.0 et 25°C, calculé du taux initial de la réaction linéaire utilisant guaiacol comme substrat.pour l’activité peroxidatique.
Réaction totale du volume		1 ml
Concentration de l’épreuve finale		100 mM phosphate buffer, pH 7.0 100 µM guaiacol 100 µM hydrogen peroxide 50 nM par haem
Références	Desser, R.K., Himmelhoch, S.R., Evans, W.H., Januska, M., Mage, M., and Shelton, E. (1972) Arch. Biochem. Biophys. 148, 452.

Assay 1
(Guaiacol - Sigma)

Assay 2
(Guaiacol)

Assay 3
(TMB)

Assay 4
(MCD)

Assay 5
(TNB)

Assay 3 (TMB)

Une unitée produit une hausse en absorbance à 655 nm de 1.0 par minute à pH 5.4 et 25°C, calculé du taux initial de la réaction linéaire utilisant 3,5,3‘,5‘-tetramethylbenzidine (TMB) comme substrat pour l’activité peroxidatique.
Réaction totale du volume		1 ml
Concentration de l’épreuve finale		100 mM phosphate buffer, pH 5.4 containing 8% (v/v) dimethylformamide 1.4 mM TMB 300 µM hydrogen peroxide 1 nM par haem
Références	Suzuki, K., Ota, H., Sasagawa, S., Sakatani, T., and Fujikura, T. (1983) Anal. Biochem. 132, 345. Marquez, L.A., and Dunford, H.B. (1997) Biochemistry 36, 9349.

Assay 1
(Guaiacol - Sigma)

Assay 2
(Guaiacol)

Assay 3
(TMB)

Assay 4
(MCD)

Assay 5
(TNB)

Assay 4 (MCD)

Une unitée produit une baisse en absorbance à 290 nm de 1.0 par minute à pH 7.0 et 25°C, calculé du taux initial de la réaction linéaire utilisant monochlorodimedon (MCD) et chloride comme substrat pour l’activité chlorinée.
Réaction totale du volume		1 ml
Concentration de l’épreuve finale		100 mM phosphate buffer, pH 7.0 100 µM MCD 100 mM NaCl 100 µM hydrogen peroxide 200 nM par haem
Références	Hager, L.P., Morris, D.R., Brown, F.S., and Eberwein, H. (1966) J. Biol. Chem. 241, 1769. Kettle, A.J., and Winterbourn, C.C. (1988) Biochim. Biophys. Acta 957, 185.

Assay 1
(Guaiacol - Sigma)

Assay 2
(Guaiacol)

Assay 3
(TMB)

Assay 4
(MCD)

Assay 5
(TNB)

Assay 5 (TNB)

Une unitée produit une baisse en absorbance à 412 nm de 1.0 à pH 7.0 et 25°C après une durée de 5 minutes dans le noir grace à la réaction de taurine chloramine (qui est produit en temps de réaction de 20 minutes en utilisant taurine et chloride comme substrat pour l’activité chlorinée) avec 5-thio-2-nitrobenzoic acid (TNB).
Réaction totale du volume	1 ml
Concentration de l’épreuve finale
a) pour la chlorination du taurine	100 mM phosphate buffer, pH 7.0 10 mM taurine 100 mM NaCl 100 µM hydrogen peroxide 20 nM par haem
b) pour l’oxidation du TNB	épreuve pour la chlorination de taurine diluée 1:2 (1+1) après un temps de réaction de 20 minutes en 100 mM phosphate buffer, pH 7.0 200 µM TNB
Références	Weiss, S.J., Klein, R., Slivka, A., and Wei, M. (1982) J. Clin. Invest. 70, 598. Kettle, A.J., and Winterbourn, C.C. (1994) Methods Enzymol. 233, 502.

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Prix de Myeloperoxidase humaine en Euro:

Unité d’emballage	100 µg par fiole	200 µg par fiole	500 µg par fiole	1000 µg par fiole
1 fiole	170	285	645	1185
5 fioles	665	1235	2850	4985

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